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高效液相色譜儀有哪些優(yōu)缺點和操作注意事項?

點擊: 次 時間:2016-08-31 11:24

一、高效液相色譜儀的優(yōu)缺點

優(yōu)點:

分離效率高,選擇性好,檢測靈敏度高,操作自動化,應(yīng)用范圍廣;

與氣相色譜法相比具有的優(yōu)點:不受試樣的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性限制,應(yīng)用范圍廣;流動相種類多,可通過流動相的優(yōu)化達(dá)到高的分離效率;一般在啊室溫下分析即可,不需高柱溫。

缺點:

分析成本高,液相色譜儀價格及日常維護(hù)費用貴,分析時間一般比氣相長。

二、高效液相色譜儀的操作注意事項

1、色譜柱的柱效和保護(hù)柱

拿到一根新柱時,一定要先看其使用說明,然后測柱效,定期檢測柱效,保留在新色譜柱上得到的色譜圖,并記錄條件,定期檢測儀器的譜帶展寬,若應(yīng)用于在線監(jiān)測,應(yīng)對色譜柱提供在線的物理保護(hù)和化學(xué)保護(hù),例如采取安裝在線過濾器,自裝填料保護(hù)柱和預(yù)裝保護(hù)柱等。在線過濾器的作用是防止顆粒在柱頭累計,優(yōu)點是基本不影響柱效,在需要高柱效的時候常用,常更換的消耗品是濾芯和墊圈。

保護(hù)柱的作用是防止柱子被化學(xué)污染,缺點是多數(shù)保護(hù)柱影響色譜柱的柱效,特別是在用微柱時,常用的是普通自裝填料的保護(hù)柱。最近新出的一些保護(hù)柱例如Sentry-guard保護(hù)柱,它的特點是高質(zhì)量、高效填料、增加分析柱效、對臟樣品載荷能力大,能延長保護(hù)柱的壽命,手可擰緊接頭,安裝時不需要工具,省時省,可換芯式設(shè)計,能采用各種不同的填料,主要適用于非常臟非常復(fù)雜的樣品本底,例如,生化樣品,環(huán)境樣品和食品等,或者不想做太多的固相萃取,不想降低柱效果等情況。

2、色譜柱的清洗

對所做的樣品要有充分的了解,用對該樣品洗脫能力最強的流動相清洗,對于硅膠柱,先用甲醇洗去極性雜質(zhì),然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100-200mL 依次活化,對于鍵和相柱,一般用甲醇-氯仿-甲醇-水依次沖洗, 每種色譜柱有特定的清洗方法, 一定要看其使用說明。

3、色譜柱的存放

存放前除去雜質(zhì)和鹽,采用合適的存放溶劑,避免色譜柱床的干枯,避免機(jī)械振動,防止細(xì)菌生長,注意存放的溫度。



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