如何保養(yǎng)液相的保護(hù)柱
點(diǎn)擊: 次 時間:2017-04-05 10:40
一、保護(hù)柱的選擇
1、選擇保護(hù)柱的原則是：在滿足分析分離要求的前提下，盡可能的選擇較短的保護(hù)柱結(jié)構(gòu)，對分離樣品有比較小的保留性的色譜填料。
2、選擇前的工作：
在選擇保護(hù)柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔。
對于大部分分析工作來說，一支1cm長的保護(hù)柱便能提供充分的保護(hù)作用。但是，如果樣品非常不清潔，或工作中要經(jīng)常更換保護(hù)柱，那么就應(yīng)該選擇2cm或3cm長的保護(hù)柱。但是，隨著保護(hù)柱的加長，保留時間也會變長。
保護(hù)柱的內(nèi)徑應(yīng)與分析柱的內(nèi)徑相同或相當(dāng)。
保護(hù)柱的填料裝填方式也很重要。目前有薄膜裝填法的保護(hù)柱，使用過程很簡單方便，而且可以在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行干裝。但是，其最大的缺點(diǎn)是不經(jīng)濟(jì)，特別是針對中國的具體情況，一次性使用相對費(fèi)用較高。另外，薄膜裝填法的保護(hù)柱所裝填的色譜填料有限，只能提供有限的保護(hù)作用;不過也因?yàn)樗b填的色譜料較少，保護(hù)柱的長度也較短，所以對分析樣品的保留時間的影響也很小。另一種保護(hù)柱結(jié)構(gòu)其實(shí)質(zhì)是縮短了色譜分析拄，設(shè)計(jì)方式上有直連式、手緊式或整體式。整體式設(shè)計(jì)是由色譜的生產(chǎn)廠商直接安裝在色譜分析柱上的，必須與色譜分析柱一同訂貨，可以非常方便地使用，但不能夠被修改。直連式結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)可在任何時候有色譜工作者來安裝連接，可以與任何品牌的色譜分析柱連接使用，而且還可以根據(jù)樣品的相關(guān)情況選擇不同的保護(hù)柱長度。手上緊即可。另外從保護(hù)柱結(jié)構(gòu)又分為是否可以更換保護(hù)柱柱芯?？梢越档捅Ｗo(hù)柱的使用成本。
一般來說，保護(hù)柱填料的選擇是由分析柱的填料決定的，正常情況下可以選擇與分析柱一樣的色譜填料，但是，根據(jù)實(shí)際工作的需要，也可以不必與分析柱的填料完全匹配。
二、更換保護(hù)柱的條件：
當(dāng)滿足下列條件之一時就應(yīng)該更換保護(hù)柱。
1、色譜柱的理論塔片數(shù)下降15%以上;
2、色譜柱柱前壓上升15%以上;
3、最難分離的物質(zhì)對分辨率下降15%以上;
4、樣品進(jìn)樣次數(shù)超過150次;
5、流動相通過1500倍的色譜柱體積。
三、保護(hù)柱/保護(hù)柱芯更換步驟：
1.將色譜柱與保護(hù)柱斷開，將保護(hù)柱(或柱芯換下)
2.將保護(hù)柱換上(或?qū)⒈Ｗo(hù)柱芯所有膠帶除去，將柱芯換上，將保護(hù)柱接上)
3.將換好的保護(hù)柱用甲醇沖洗30分鐘
4.將色譜柱接上
四、在線過濾器預(yù)柱保護(hù)柱的原理區(qū)別
在線過濾器在泵和進(jìn)樣閥之間，只有篩板，只是物理過濾，
保護(hù)柱在進(jìn)樣閥和色譜柱之間，有填料，可吸附物質(zhì)
預(yù)柱是個混淆的概念，pre-column,一般可直譯為預(yù)混合柱，放在泵和進(jìn)樣閥之間，有硅膠填料，可以降低色譜柱填料被酸、堿流動相溶解
同時也有把預(yù)柱當(dāng)保護(hù)柱的
五、清洗
保護(hù)柱在清洗時首先要拆下分析柱，以免洗脫物進(jìn)入分析柱;然后選擇適當(dāng)?shù)牧鲃酉噙M(jìn)行沖洗。
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1、選擇保護(hù)柱的原則是：在滿足分析分離要求的前提下，盡可能的選擇較短的保護(hù)柱結(jié)構(gòu)，對分離樣品有比較小的保留性的色譜填料。
2、選擇前的工作：
在選擇保護(hù)柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔。
對于大部分分析工作來說，一支1cm長的保護(hù)柱便能提供充分的保護(hù)作用。但是，如果樣品非常不清潔，或工作中要經(jīng)常更換保護(hù)柱，那么就應(yīng)該選擇2cm或3cm長的保護(hù)柱。但是，隨著保護(hù)柱的加長，保留時間也會變長。
保護(hù)柱的內(nèi)徑應(yīng)與分析柱的內(nèi)徑相同或相當(dāng)。
保護(hù)柱的填料裝填方式也很重要。目前有薄膜裝填法的保護(hù)柱，使用過程很簡單方便，而且可以在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行干裝。但是，其最大的缺點(diǎn)是不經(jīng)濟(jì)，特別是針對中國的具體情況，一次性使用相對費(fèi)用較高。另外，薄膜裝填法的保護(hù)柱所裝填的色譜填料有限，只能提供有限的保護(hù)作用;不過也因?yàn)樗b填的色譜料較少，保護(hù)柱的長度也較短，所以對分析樣品的保留時間的影響也很小。另一種保護(hù)柱結(jié)構(gòu)其實(shí)質(zhì)是縮短了色譜分析拄，設(shè)計(jì)方式上有直連式、手緊式或整體式。整體式設(shè)計(jì)是由色譜的生產(chǎn)廠商直接安裝在色譜分析柱上的，必須與色譜分析柱一同訂貨，可以非常方便地使用，但不能夠被修改。直連式結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)可在任何時候有色譜工作者來安裝連接，可以與任何品牌的色譜分析柱連接使用，而且還可以根據(jù)樣品的相關(guān)情況選擇不同的保護(hù)柱長度。手上緊即可。另外從保護(hù)柱結(jié)構(gòu)又分為是否可以更換保護(hù)柱柱芯?？梢越档捅Ｗo(hù)柱的使用成本。
一般來說，保護(hù)柱填料的選擇是由分析柱的填料決定的，正常情況下可以選擇與分析柱一樣的色譜填料，但是，根據(jù)實(shí)際工作的需要，也可以不必與分析柱的填料完全匹配。
二、更換保護(hù)柱的條件：
當(dāng)滿足下列條件之一時就應(yīng)該更換保護(hù)柱。
1、色譜柱的理論塔片數(shù)下降15%以上;
2、色譜柱柱前壓上升15%以上;
3、最難分離的物質(zhì)對分辨率下降15%以上;
4、樣品進(jìn)樣次數(shù)超過150次;
5、流動相通過1500倍的色譜柱體積。
三、保護(hù)柱/保護(hù)柱芯更換步驟：
1.將色譜柱與保護(hù)柱斷開，將保護(hù)柱(或柱芯換下)
2.將保護(hù)柱換上(或?qū)⒈Ｗo(hù)柱芯所有膠帶除去，將柱芯換上，將保護(hù)柱接上)
3.將換好的保護(hù)柱用甲醇沖洗30分鐘
4.將色譜柱接上
四、在線過濾器預(yù)柱保護(hù)柱的原理區(qū)別
在線過濾器在泵和進(jìn)樣閥之間，只有篩板，只是物理過濾，
保護(hù)柱在進(jìn)樣閥和色譜柱之間，有填料，可吸附物質(zhì)
預(yù)柱是個混淆的概念，pre-column,一般可直譯為預(yù)混合柱，放在泵和進(jìn)樣閥之間，有硅膠填料，可以降低色譜柱填料被酸、堿流動相溶解
同時也有把預(yù)柱當(dāng)保護(hù)柱的
五、清洗
保護(hù)柱在清洗時首先要拆下分析柱，以免洗脫物進(jìn)入分析柱;然后選擇適當(dāng)?shù)牧鲃酉噙M(jìn)行沖洗。
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