液相色譜儀出現(xiàn)峰分叉可能有以下幾方面原因：

1、色譜柱污染

在開始時沒問題，在使用一段時間后出現(xiàn)這個問題，可能是由于污染引起的。這時需要對色譜柱加強沖洗，即使用比方法流動相更強的溶劑沖洗色譜柱。

2、保護柱失效

如果樣品基質(zhì)比較臟，使用一段時間之后，發(fā)現(xiàn)的峰分叉或拖尾等問題，很有可能是保護柱失效造成的。一般粗略判斷標準，塔板數(shù)、壓力或分離度的改變超過10%，就需要更換保護柱了。保護柱是消耗品，建議直接更換，不需要再生。

3、接頭連接不正確

如果色譜柱在使用過程中發(fā)現(xiàn)每個峰的峰形都出現(xiàn)問題，先考察是否有連接問題。管線可能太長或太短，這種情況可能導致滲漏或峰分叉/拖尾。如果管線太長，密封圈位置不當，將發(fā)生滲漏。如果管線推出的距離不夠，將會產(chǎn)生一段死空間，形成混合腔，導致柱外體積，使峰形變壞。

4、溶劑效應

在反相LC中、如使用10O%有機溶劑或10O%強溶劑，大體積進樣時，將使色譜峰過早洗脫出色譜柱，導致峰變形。進樣溶劑改為用水稀釋，與流動相更為兼容，即使進樣體積較大也不會出現(xiàn)峰變形。較早流出的峰或靠近溶劑前沿的峰更容易出現(xiàn)拖尾。在液相色譜中用溶于流動相的小體積進樣最為理想。

5、樣品過載

當進樣量超過柱子的容量，樣品峰會呈現(xiàn)分叉或拖尾，解決方案就是減少進樣量。

6、色譜柱塌陷

由于柱塌陷引起的峰分叉，很難修復。如果流動相pH>7或在色譜柱pH耐受圍臨界點附近長時間使用，是比較容易造成硅膠填料溶解塌陷。如果出現(xiàn)色譜柱塌陷，您會看到色譜圖中的每個峰峰形都會發(fā)生變化（峰拖尾、加寬或分叉），短時間內(nèi)可以反方向運行，建議直接更換色譜柱。日常使用的過程中注意將溫度降低到40℃以下，特別是使用高pH流動相時。

7、柱前篩板部分堵塞長期分析臟樣品

如果沒有保護柱或在線柱前過濾器，顆粒物和強吸附物很可能在柱入口篩板發(fā)生堵塞，同時伴隨著壓力升高，解決辦法一般是色譜柱反沖。

8、色譜柱性能下降

使用色譜柱時，會用其分析各種目標物、使用各種流動相并分離不同的樣品基質(zhì)，經(jīng)過長時間的使用，色譜柱會受到這些物質(zhì)的影響發(fā)生一些微妙的變化，從而引起峰分叉、拖尾或保留時間的改變。

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