大部分女生每天都要用化妝品，因?yàn)橹苯咏佑|到人的皮膚，安全性是基本的要求?；瘖y品禁用組分一般是毒性或危害性較大的化學(xué)物質(zhì)，長期使用會(huì)嚴(yán)重?fù)p害肌膚等。

一、相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)及方法原理

本方案參照2015版《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》中禁用組分檢驗(yàn)方法2.4第二法：高效液相色譜-紫外檢測器/熒光檢測器法，該法適用于化妝品中雌三醇等7種組分含量的測定。

樣品提取后，經(jīng)高效液相色譜儀分離，紫外檢測器檢測，以保留時(shí)間定性，峰面積定量。

二、儀器和試劑

1、上海儀電分析LC220高效液相色譜儀，配備紫外檢測器；

2、上海儀電分析AS2000自動(dòng)進(jìn)樣器；

3、色譜柱：C18柱，4.6 mm×250 mm，粒徑為5 μm，或其他等效色譜柱；

4、電子分析天平：感量為0.0001g（即萬分之一電子天平）；

5、離心機(jī)：轉(zhuǎn)速>3000r/min；

6、超聲波發(fā)生器；

7、甲醇；

8、飽和氯化鈉溶液；

9、環(huán)己烷；

10、硫酸[j(H2SO4)＝2%]：取硫酸（r20＝1.84g/mL）2mL，緩慢加入到98mL水中，混勻。

三、測定方法

3.1 標(biāo)準(zhǔn)系列的制備

3.1.1標(biāo)準(zhǔn)溶液 （或直接購買混標(biāo)）

雌激素標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別稱取雌酮、雌二醇、雌三醇、己烯雌酚各0.2g（精確到0.0001g），用少量甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度。

雄激素標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別稱取睪丸酮、甲基睪丸酮各0.6g（精確到0.0001g），用少量甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度，配制成含睪丸酮、甲基睪丸酮為6.00mg/mL的溶液。取此溶液 10.0mL置100mL容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度。

孕激素標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取黃體酮 0.6g（精確到 0.0001g），用少量甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度，配制成含孕**6.00mg/mL的溶液。取此溶液 10.0mL置于100mL容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度。

混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：分別取雌激素標(biāo)準(zhǔn)溶液50.00mL，雄激素標(biāo)準(zhǔn)溶液5.00mL和孕激素標(biāo)準(zhǔn)溶液5.00mL置于100mL容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度，配制成1mL分別含4種雌激素各1.00mg、2種雄激素各30.0μg和1種孕激素30.0μg的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。

3.1.2 混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的制備

取混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液0.00mL、1.00mL、2.00mL、5.00mL于10mL具塞比色管中，用甲醇稀釋至10mL刻度，制得混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

3.2 樣品處理

溶液狀樣品：稱取樣品 1-2g（精確到0.001g）于10mL具塞比色管中，在水浴上蒸除乙醇等揮發(fā)性有機(jī)溶劑，用甲醇稀釋到10mL，作為樣品待測溶液。

膏狀、乳狀樣品：稱取樣品 1-2g（精確到 0.001g）于100mL錐形瓶中，加入飽和氯化鈉溶液50mL，硫酸2mL，振蕩溶解，轉(zhuǎn)移至100mL分液漏斗中，以環(huán)己烷30mL分三次萃取，必要時(shí)離心分離。合并環(huán)己烷層并在水浴上蒸除。用甲醇溶解殘留物，轉(zhuǎn)移到 10mL具塞比色管中，用甲醇稀釋到刻度?；靹蚝螅?jīng)0.45μm濾膜過濾，濾液作為樣品待測溶液。

四、測定結(jié)果

4.1 標(biāo)樣譜圖